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¿Pueden varios anticuerpos unirse al mismo antígeno?

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Dada la diferencia de tamaño entre los antígenos de molécula pequeña y los anticuerpos, ¿es posible que varios anticuerpos se unan al mismo antígeno si reconocen dominios diferentes en ese antígeno? Cuando el antígeno es una proteína en lugar de una molécula pequeña, ¿es más probable que se unan múltiples anticuerpos?


No solo es posible que varios anticuerpos se unan a un solo antígeno, cuando eso sucede, es más probable que desencadene una respuesta inmune completa.

Aquí hay una descripción del concepto de una empresa que vende anticuerpos para investigación. Para ayudar a comprender la cita, necesitará saber que la parte de un antígeno a la que se une un anticuerpo se llama epítopo.

Debido a que un antígeno puede tener múltiples epítopos diferentes, varios anticuerpos pueden unirse a la proteína. Cuando dos o más sitios de unión al antígeno son idénticos, un anticuerpo puede formar un enlace más fuerte con el antígeno que si solo se une uno de los sitios del anticuerpo. Los antígenos con múltiples sitios de unión idénticos se denominan multivalentes y los anticuerpos pueden unirse con más fuerza.

Aquí hay un artículo que describe, entre otras cosas, la importancia de agruparse en células B cuando múltiples receptores de células B se unen a un solo antígeno multivalente.


Tinción de triple inmunofluorescencia con anticuerpos producidos en la misma especie para estudiar el patrón de inervación complejo de los quimiorreceptores intrapulmonares

Un problema general en inmunocitoquímica es el desarrollo de un método de inmunomarcaje múltiple confiable cuando deben usarse anticuerpos primarios que se originan en la misma especie. Hemos desarrollado un protocolo para la inmunodetección de tres antígenos en una sola preparación de tejido, utilizando anticuerpos primarios no conjugados producidos en la misma especie. La detección inmunocitoquímica de la óxido nítrico sintasa neuronal, el péptido relacionado con el gen de la calcitonina y la calbindina D28k en el pulmón de ratas demostró que parte de los cuerpos neuroepiteliales pulmonares son contactados selectivamente por al menos tres poblaciones de fibras nerviosas diferentes. El primer antígeno se detectó mediante la amplificación de la señal de tiramida, un método muy sensible que permite una dilución del primer anticuerpo primario mucho más allá del límite de detección de los anticuerpos secundarios marcados con fluorescencia. El segundo antígeno se visualizó mediante un anticuerpo Fab monovalente secundario conjugado con fluoróforo que al mismo tiempo bloquea el acceso del tercer anticuerpo secundario al segundo anticuerpo primario. Además, la monovalencia del fragmento Fab evita que el tercer anticuerpo primario se una al anticuerpo secundario del segundo paso. La técnica de triple tinción descrita aquí es de aplicación general, utiliza solo productos disponibles comercialmente y permite la detección de tres antígenos en la misma preparación con anticuerpos primarios que se generan en la misma especie.


Ensayo multiplex para la medición simultánea de anticuerpos contra múltiples antígenos de Plasmodium falciparum

Los anticuerpos contra Plasmodium falciparum se miden clásicamente usando el ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA). Aunque es muy sensible, esta técnica requiere mucha mano de obra cuando es necesario cribar un gran número de muestras frente a múltiples antígenos. La tecnología de matriz de suspensión (SAT) podría ser una alternativa al ELISA, ya que permite la medición de anticuerpos contra múltiples antígenos simultáneamente con un pequeño volumen de muestra. Este estudio buscó adaptar el nuevo sistema multiplex SAT para medir anticuerpos contra nueve antígenos candidatos a vacuna contra la malaria, incluidas proteínas recombinantes de dos variantes de la proteína de superficie de merozoito 1, dos variantes de antígeno de merozoito apical 1, antígeno de unión a eritrocito 175, proteína de superficie de merozoito 3, y péptidos de la proteína circumsporozoíto, el antígeno de superficie del eritrocito anular y el antígeno de la etapa hepática 1. Se acoplaron diversas concentraciones de los antígenos a microesferas con diferentes direcciones espectrales, y las muestras de plasma de adultos cameruneses se examinaron mediante SAT en formatos mono y multiplex y por ELISA. Las cantidades óptimas de proteína necesarias para realizar el ensayo SAT fueron de 10 a 100 veces menores que las necesarias para ELISA. Se encontró una excelente concordancia entre los formatos simple y múltiple (R & gt o = 0,96), incluso cuando se utilizaron dos variantes del mismo antígeno. El ensayo multiplex fue rápido, reproducible, requirió menos de 1 ml de plasma y tuvo una buena correlación con ELISA. Por lo tanto, SAT proporciona una nueva herramienta importante para estudiar la respuesta inmune a la malaria de manera rápida y eficiente en grandes poblaciones, incluso cuando la cantidad de plasma disponible es limitada, por ejemplo, en estudios de recién nacidos o en sangre de punción digital.

Cifras

Determinando la cantidad óptima de ...

Determinación de la cantidad óptima de antígeno para acoplar las microesferas. Diferentes cantidades de…

Comparación de MFI entre monoplex ...

Comparación de MFI entre ensayos monoplex y multiplex y reproducibilidad del ensayo. Microesferas, acopladas ...

Correlación entre los resultados de…

Correlación entre los resultados de ELISA y multiplex SAT. Un total de 50 ...


Consideraciones de selección de anticuerpos primarios para el análisis de transferencia Western

Anticuerpos policlonales vs monoclonales vs recombinantes

PoliclonalMonoclonalRecombinante
DefiniciónColección de anticuerpos de diferentes células B que reconocieron múltiples epítopos en el mismo antígenoAnticuerpo único producido por clones idénticos de células B que reconocen un epítopo en el mismo antígenoAnticuerpo único derivado de ADN recombinante. Puede modificarse a nivel de ADN o utilizarse para generar un conjunto de anticuerpos definido.
VentajasAltamente sensible. Muchos anticuerpos en el conjunto policlonal pueden unirse a epítopos en el anticuerpo diana.Consistencia de lote a lote. Conocimiento histórico, a menudo bien caracterizado, de clones específicos, publicaciones para el desempeño en Western Blot.Suministro estable a largo plazo con consistencia de lote a lote. No susceptible a la deriva de la línea celular.
DesventajasLa variabilidad de lote a lote del conjunto de anticuerpos puede resultar en una detección inconsistente. Los epítopos similares al objetivo pueden contribuir a la detección de bandas inespecíficas.La sensibilidad de detección depende de la abundancia y exposición de un solo epítopo. La deriva de la línea celular podría resultar en cambios sutiles a largo plazo en el anticuerpo.Muy especializado y dependiente del epítopo. Mayor tiempo de desarrollo. Puede necesitar una optimización más inicial. Por lo general, un precio más alto.

Los anticuerpos policlonales, monoclonales y recombinantes funcionan bien para la transferencia Western. Los anticuerpos policlonales son un conjunto de muchos anticuerpos monoclonales, que pueden variar de una inmunización a otra y de un lote a otro. Los anticuerpos policlonales reconocen múltiples epítopos de un antígeno y, por lo tanto, suelen ser más sensibles que los anticuerpos monoclonales que reconocen solo un epítopo. Esto puede ser un beneficio cuando la abundancia de epítopos, el enmascaramiento de epítopos o la exposición de epítopos son una preocupación. Los anticuerpos policlonales son menos costosos y su producción requiere menos tiempo. Los anticuerpos monoclonales se valoran por su consistencia de lote a lote y, en muchos casos, por su extenso historial de caracterización y publicación. Los anticuerpos monoclonales generalmente son producidos por líneas celulares que generan un clon de anticuerpo individual. Estas líneas celulares (o hibridomas) se cultivan en cultivo celular cuando se necesita el anticuerpo para la producción. Al igual que cualquier línea celular que se propaga a menudo, estas líneas celulares podrían sufrir cambios graduales que afecten los rendimientos de producción de anticuerpos o incluso las características de los anticuerpos. Los anticuerpos recombinantes son la mejor opción para una producción uniforme de anticuerpos sin origen animal y una coherencia de lote a lote. Los anticuerpos recombinantes se producen transfectando líneas celulares de producción con ADN recombinante que codifica las inmunoglobulinas deseadas. Los anticuerpos recombinantes tienen varios beneficios: se pueden modificar en sitios específicos para agregar las características deseadas a las IgG y no están sujetos a la deriva de la línea celular, como los monoclonales derivados de hibridomas. Los anticuerpos recombinantes se pueden combinar para generar grupos de anticuerpos recombinantes, tales como anticuerpos primarios policlonales recombinantes o anticuerpos secundarios recombinantes superclonales.

Los anticuerpos se proporcionan habitualmente purificados en PBS o tampones similares; sin embargo, en algunos casos, son necesarias preparaciones de anticuerpos crudos, como suero o líquido ascítico, para mantener determinadas características de anticuerpos o rendimiento de anticuerpos. Es importante optimizar los protocolos de transferencia Western para minimizar el impacto de las impurezas presentes en las preparaciones de anticuerpos crudos en el fondo.

Detección directa vs indirecta

Se pueden utilizar métodos de detección tanto directos como indirectos en la transferencia Western. Cada método ofrece sus propias ventajas y desventajas. Con el método de detección directa, se usa un anticuerpo primario conjugado con enzima o fluoróforo para detectar el antígeno de interés en la transferencia. En el método de detección indirecta, primero se usa un anticuerpo primario no marcado para unirse al antígeno. Posteriormente, el anticuerpo primario se detecta usando un anticuerpo secundario conjugado con enzima o fluoróforo. El método indirecto ofrece muchas ventajas sobre el método directo, que se describen a continuación.

  • Requiere solo un anticuerpo
  • Ahorra tiempo al eliminar el paso de incubación de anticuerpos secundarios
  • Elimina el posible fondo por reactividad cruzada de anticuerpos secundarios en determinadas muestras.
  • Amplificación de señal, ya que múltiples secundarios etiquetados se unen a cada primario.
  • Muchas opciones que utilizan anticuerpos secundarios etiquetados con HRP, Alexa Fluor o Alexa Fluor Plus
  • Ahorre tiempo con la detección multiplexada utilizando anticuerpos secundarios fluorescentes
  • Es posible una mayor amplificación de la señal con secundarios biotinilados y estreptavidina marcada con enzima o fluorescente.
  • La etiqueta puede interferir con la unión del objetivo, lo que da como resultado una menor sensibilidad y un fondo más alto.
  • La selección de anticuerpos primarios conjugados directamente es limitada
  • Se requieren pasos adicionales
  • Potencial de unión no específica que puede aumentar el fondo en ciertas muestras.

Consideraciones sobre especies hospedadoras

Se utilizan múltiples especies para generar anticuerpos que se pueden utilizar en aplicaciones de transferencia Western. Más comúnmente: ratón, conejo, rata, cabra, burro y pollo. El anticuerpo primario de la especie hospedadora a elegir dependerá de si se está probando un solo objetivo o si se están probando múltiples objetivos en un experimento de inmunotransferencia de tipo western múltiple. Cuando se investiga solo un antígeno a la vez, teóricamente se puede usar cualquier especie hospedadora; sin embargo, la mayoría de los anticuerpos de investigación primarios para transferencia Western se producen a partir de conejos inmunizados (policlonales, monoclonales, recombinantes) o ratones (monoclonales derivados de hibridomas). Algunas especies hospedadoras ofrecen ventajas adicionales sobre otras, por ejemplo, debido a su tamaño o biología inmunológica. Al comparar ratones o conejos, por ejemplo, los conejos suelen tolerar mejor las inmunizaciones y tienen una vida útil significativamente más larga que los ratones. Además, los conejos exhiben un repertorio natural de anticuerpos más diverso que los ratones, lo que hace que los conejos sean un huésped popular para la generación de anticuerpos policlonales, monoclonales y recombinantes de conejo. Cuando se busca generar el anticuerpo monoclonal o recombinante más adecuado para la transferencia Western, el mayor repertorio de anticuerpos producidos en conejos permite un cribado, aislamiento y clonación más exitosos de anticuerpos recombinantes de alta afinidad. Esto es especialmente importante cuando se pretende producir anticuerpos de transferencia Western contra epítopos más desafiantes que pueden no ser factibles de producir con otros sistemas.

Al realizar una transferencia de western multiplex, utilice anticuerpos primarios de diferentes especies de hospedadores para cada objetivo que se esté probando. Idealmente, use una combinación de anticuerpos de dos especies relacionadas lejanamente como rata y conejo, evitando combinaciones como ratón y rata o cabra y oveja. Esto ayudará en la selección de anticuerpos secundarios apropiados para minimizar la posible reactividad cruzada de anticuerpos, lo que puede conducir a resultados confusos.

Consideraciones de host de multiplexación

Primera especie hospedadora de anticuerposEspecies hospedadoras de anticuerpos secundarios
RataConejo
RatónConejo
CabraConejo o raton
RatónRataX
CabraOvejaX

Anticuerpos validados por Western blot

Aunque los anticuerpos están diseñados para reconocer un antígeno diana específico, es posible que no funcionen por igual en todas las aplicaciones. Elija anticuerpos designados específicamente para Western Blot o que incluyan Western Blot como aplicación. Además, es importante confirmar que el anticuerpo es específico hacia la proteína nativa o desnaturalizada, para determinar si debe realizarse SDS-PAGE o PAGE nativa.

Al seleccionar un anticuerpo primario, confirme:

  1. El anticuerpo está validado para la transferencia Western
  2. Especificidad del anticuerpo hacia la proteína nativa o desnaturalizada

Los anticuerpos de Invitrogen se someten a un riguroso enfoque de prueba de 2 partes. Parte 1: Verificación de la especificidad del objetivo, Parte 2: Validación funcional de la aplicación. La verificación de la especificidad del objetivo ayuda a garantizar que el anticuerpo se una al objetivo correcto. La mayoría de los anticuerpos se desarrollaron pensando en aplicaciones específicas. La prueba de que un anticuerpo genera resultados aceptables en una aplicación específica es la segunda parte de la confirmación del rendimiento del anticuerpo. Obtenga más información sobre el proceso de validación de anticuerpos de Invitrogen.


¿No es necesario que las pruebas de anticuerpos detecten múltiples configuraciones de anticuerpos?

Tengo la impresión de que diferentes personas pueden producir múltiples anticuerpos con diferentes estructuras de sitios de unión para el mismo patógeno. Cada pieza de literatura que leo se refiere al `` anticuerpo '' para un patógeno determinado como este. No hay & quotaanticuerpo. & Quot; No hay & quot; el anticuerpo & quot; para el SARS-CoV-2.

El SARS-CoV-2, por ejemplo, puede tener múltiples áreas únicas en sus estructuras de proteínas en las que se pueden generar múltiples anticuerpos diferentes, por lo que un paciente recuperado puede tener anticuerpos ligeramente diferentes en comparación con otro paciente recuperado, pero ambos anticuerpos se unirán a diferentes áreas únicas de SARS-CoV-2.

Incluso hay compañías que han reducido numerosos candidatos de anticuerpos diferentes a unos pocos que tienen capacidades de neutralización especialmente altas contra el SARS-COV-2, el punto es que múltiples anticuerpos diferentes pueden unirse a un patógeno.

Entonces, cuando la gente habla de una & prueba de anticuerpo de cuota, & quot, ¿de qué están hablando exactamente?

¿La prueba realmente detecta la presencia de múltiple diferentes anticuerpos, todos los cuales han demostrado efectos de unión con el virus?

¿O las pruebas solo detectan una configuración específica de anticuerpo y pueden pasar por alto otras configuraciones de anticuerpos, lo que da como resultado un falso negativo (el paciente en realidad se había infectado y produjo anticuerpos, pero no aquellos para los que la prueba es específica)?

Probablemente dependa un poco de cómo se haga la prueba. Creo que la mayoría de las pruebas tendrán una proteína viral inmovilizada y detectarán anticuerpos que se unen a esa proteína. No se detectará ningún anticuerpo que se una a una proteína diferente, o un epítopo de la proteína que sea inaccesible debido a cómo se inmovilizó. Pero las pruebas también suelen dar una lectura binaria, por lo que si algún anticuerpo se une, será positivo.

Tiene razón en que una respuesta de anticuerpos incluye muchos anticuerpos diferentes. Es poco probable que alguien que tenga anticuerpos contra un virus no tenga ninguno que se una a la proteína que usa para hacer la prueba. Suponiendo que la prueba se hizo bien.

Tiene toda la razón en que, en general, los anticuerpos producidos por una persona pueden ser diferentes de los producidos por otra persona. que, en principio, podría dificultar la diferenciación de anticuerpos específicos frente a una enfermedad.

Afortunadamente, cuando hacemos pruebas de anticuerpos, no estamos probando la presencia de una conformación de anticuerpos específica. No necesitamos identificar la estructura proteica específica de los anticuerpos anti-coronavirus. Solo necesitamos saber si están presentes o no. y lo hacemos tomando una muestra de suero, que puede incluir o no anticuerpos contra una enfermedad en particular, y exponerla a una muestra de antígeno de la enfermedad en cuestión. Si hay anticuerpos contra esa enfermedad, se produce una reacción visible porque los anticuerpos tienden a unirse a múltiples antígenos y se produce una aglutinación visible de los complejos de antígeno y anticuerpo.

Por lo tanto, no importa qué sitio de unión en particular reconozca el anticuerpo. Solo importa que el anticuerpo reconozca el antígeno.

Ahora bien, la selección del antígeno es en sí misma un problema técnico. La mayoría de las células del cuerpo humano escupen continuamente en su superficie pequeños trozos de las proteínas que están produciendo específicamente para que el sistema inmunológico pueda mirar esos trozos y reaccionar si detecta algo mal. Esos trozos en sí mismos son los antígenos. Debido a que estos fragmentos son en sí mismos subconjuntos del virus, la forma más fácil de asegurarse de que su antígeno activará todos los anticuerpos es usar el virus completo. Pero, por razones obvias, es menos que ideal requerir el uso de virus activos para las pruebas de diagnóstico. Por lo general, las pruebas de anticuerpos utilizan una parte de la proteína viral. pero es importante asegurarse de que esta proteína sea exclusiva del virus que está tratando de detectar, o puede ver reacciones de anticuerpos que en realidad no son específicos de su virus en particular. La prueba de anticuerpos CDC utiliza una secuencia de la proteína de pico.


La biología de la cabra

Debido a estos múltiples epítopos, más de un tipo de anticuerpo puede unirse a un antígeno correspondiente y debido a que los anticuerpos tienen dos brazos, un anticuerpo a veces puede unirse a dos antígenos. Si la cantidad de antígeno a anticuerpo está en equilibrio, se pueden formar grandes complejos de antígeno / anticuerpos. Esto hace que el complejo se precipite.

En un ensayo AGID, se prepara un disco de agar (que es una especie de gelatina rígida) en una placa de Petri. Se perforan orificios y se coloca el antígeno en un orificio y la solución de anticuerpo en otro. Las soluciones se difundirán fuera de los orificios hacia el agar. Cuando el antígeno se encuentra con los anticuerpos, se producirá la unión. En el área donde hay el nivel adecuado de anticuerpo contra el antígeno, se forma una delgada línea blanca que es visible a simple vista.

Las pruebas AGID son muy precisas con respecto a la unión específica, por lo que los falsos positivos son raros, pero la prueba no detecta niveles bajos de anticuerpos. Esto da como resultado falsos negativos cuando el sujeto de prueba se encuentra en las primeras etapas de la infección y tiene un nivel bajo de anticuerpos.


Policlonal versus monoclonal

En el laboratorio, los anticuerpos a menudo se clasifican en policlonales o monoclonales. Los anticuerpos policlonales son una población heterogénea de anticuerpos que reconocen múltiples regiones (denominadas epítopos) del mismo antígeno. Estos anticuerpos a menudo dan una respuesta más robusta, pero es más probable que reaccionen de forma cruzada con proteínas similares.

Monoclonal se refiere al hecho de que los anticuerpos se producen a partir de un solo clon y reconocen exactamente el mismo epítopo del antígeno. Estas moléculas suelen ser muy específicas, pero son más sensibles a la pérdida de un epítopo por modificación del antígeno.

La capacidad de los anticuerpos para reconocer proteínas específicas es útil en muchos procedimientos de laboratorio diferentes, como inmunotransferencia (Western Blots), FACS, inmunohistoquímica (IHC) y ELISA. Generalmente, estos procedimientos utilizan 2 anticuerpos diferentes: el primario, que reconoce la proteína en cuestión, y el anticuerpo secundario, que es específico para los anticuerpos del organismo que generó el anticuerpo primario. El anticuerpo secundario generalmente se une a una sustancia química o enzima para amplificar la señal resultante.


El sitio de combinación de antígenos

  • tres en la cadena pesada y
  • tres en la cadena ligera
  • de estructuras de anticuerpos
  • del sistema genético que genera anticuerpos con tantas CDR diferentes.
  • la estructura terciaria de un brazo de un anticuerpo específico para la lisozima que se encuentra en la clara de huevo de gallina (arriba a la derecha) unido a
  • lisozima (abajo a la izquierda).
  • región constante de la cadena ligera (CL ) y la primera región constante de la cadena pesada (CH )
  • regiones variables del pesado (VH ) y cadenas ligeras (VL )
  • la tercera región hipervariable de las cadenas pesada (Hv3H) y ligera (Hv3L). La importancia del par de regiones determinantes de complementariedad o hipervariables en la unión del epítopo es típica tanto de los anticuerpos como de los receptores de células T para el antígeno. Esto tiene sentido ya que las oportunidades para la diversidad genética en esos sitios son mucho mayores que para la primera y la segunda CDR. [Enlace]
  • Gln121 es una glutamina que es una característica dominante del epítopo de la lisozima.

La segunda imagen (también cortesía del Dr. Amit) es un modelo que llena el espacio del mismo anticuerpo con la cadena ligera en amarillo y la cadena pesada en azul. La vista está mirando hacia abajo en la superficie de unión del epítopo (izquierda) y el epítopo en la lisozima (derecha). En el complejo antígeno-anticuerpo, las dos superficies encajan perfectamente. Los 17 residuos de aminoácidos que entran en contacto con la lisozima en el complejo antígeno-anticuerpo están numerados (1 & ndash7 en la cadena L, 8 & ndash17 en la cadena H. Los 16 residuos de aminoácidos de la lisozima que entran en contacto con el anticuerpo, es decir, que componen su epítopo también son El número 14 es Gln-121.

los fuerza de la unión de un anticuerpo a su antígeno se llama su afinidad. La afinidad se analiza en una página separada. Enlace a él.


Anticuerpos policlonales vs monoclonales

¿Qué es un anticuerpo policlonal?
Un anticuerpo policlonal representa una colección de anticuerpos de diferentes células B que reconocen múltiples epítopos en el mismo antígeno. Cada uno de estos anticuerpos individuales reconoce un epítopo único que se encuentra en ese antígeno.

  • Barato de producir.
  • Rápido de producir. Anticuerpo purificado listo para usar en menos de cuatro meses.
  • Fácil de almacenar.
  • Altamente estable y tolerante a cambios de pH o tampón.
  • Mayor afinidad global del anticuerpo contra el antígeno debido al reconocimiento de múltiples epítopos.
  • En general, la capacidad de detectar múltiples epítopos proporciona una detección más sólida.
  • Ofrece una mayor sensibilidad para detectar proteínas que están presentes en pequeñas cantidades en una muestra, ya que múltiples anticuerpos se unirán a múltiples epítopos de la proteína.
  • Ideal como anticuerpo de captura en un ELISA Sandwich. Mayor capacidad para capturar rápidamente la proteína objetivo.
  • La afinidad superior del anticuerpo generalmente da como resultado una unión más rápida al antígeno diana. Ideal en ensayos que requieren una captura rápida de la proteína como IP o ChIP.
  • Significativamente más robusto cuando se analizan proteínas que muestran ligeras variaciones en epítopos individuales como desnaturalización, polimorfismo o cambios conformacionales.
  • Superior para su uso en la detección de una proteína nativa en múltiples tipos de análisis.
  • Mucho más fácil de acoplar con etiquetas de anticuerpos. Es menos probable que afecte la capacidad de unión.
  • Variabilidad entre diferentes lotes producidos en diferentes animales en diferentes momentos
  • Mayor potencial de reactividad cruzada debido al reconocimiento de múltiples epítopos.
  • Normalmente se requerirá la purificación por afinidad del suero para minimizar la reactividad cruzada

¿Qué es un anticuerpo monoclonal?
Un anticuerpo monoclonal, por el contrario, representa el anticuerpo de una célula B productora de un solo anticuerpo y, por lo tanto, solo se une a un epítopo único. Cada anticuerpo individual en una mezcla policlonal es técnicamente un anticuerpo monoclonal; sin embargo, este término generalmente se refiere a un proceso mediante el cual la célula B real se aísla y se fusiona con una línea celular de hibridoma inmortal para que se puedan generar grandes cantidades de anticuerpo idéntico.

  • Puede producir grandes cantidades de anticuerpos idénticos. Homogeneidad lote a lote.
  • Alta especificidad para un solo epítopo. Probabilidad reducida de reactividad cruzada.
  • Puede proporcionar mejores resultados en ensayos que requieren cuantificación de los niveles de proteína.
  • Significativamente más caro de producir.
  • Requiere mucho más tiempo para producir y desarrollar el clon hibridado.
  • Los pequeños cambios en la estructura del epítopo a menudo hacen que el anticuerpo monoclonal sea incapaz de detectar la proteína diana.
  • Condiciones de almacenamiento más exigentes para el clon.
  • Se requieren capacidades de cultivo y purificación celular.
  • Menos robusto para detectar la proteína en estado desnaturalizado o conformación alterada.
  • Menos ideal para aplicaciones que requieren una captura rápida de la proteína objetivo.
  • Más sensible a las condiciones de pH y tampón.
  • Más susceptible a cambios de unión cuando se etiqueta.
  • Para compensar muchas de estas desventajas, es necesario producir un conjunto de varios anticuerpos monoclonales. Por lo general, esto es prohibitivo en cuanto a costo y tiempo.

Resumen:
Para aplicaciones como la fabricación de diagnóstico y el desarrollo de fármacos terapéuticos que requieren grandes volúmenes de anticuerpos idénticos específicos para un solo epítopo, los anticuerpos monoclonales pueden ser una solución ideal. Sin embargo, para aplicaciones de investigación general, las ventajas de los anticuerpos policlonales suelen superar las pocas ventajas que proporcionan los anticuerpos monoclonales. Con la purificación por afinidad del suero contra pequeñas dianas de antígenos, las ventajas de los anticuerpos policlonales se amplían aún más. Los anticuerpos monoespecíficos, que se analizan en la siguiente sección, ofrecen lo que creemos que es lo mejor de ambos mundos al combinar una alta especificidad de anticuerpos con un bajo costo y una producción rápida.


Definición

Un antígeno se refiere a una toxina u otra sustancia extraña que induce una respuesta inmune en el cuerpo, especialmente la producción de anticuerpos, mientras que un hapteno se refiere a una molécula pequeña que, cuando se combina con un portador más grande, como una proteína, puede provocar la producción. de anticuerpos que se unen específicamente a él (en estado libre o combinado). Estas dos definiciones explican la diferencia básica entre un antígeno y un hapteno.

Antígenos completos o incompletos

Los antígenos son moléculas completas, mientras que los haptenos son antígenos incompletos. Por lo tanto, esta es una diferencia importante entre un antígeno y un hapteno.

Unión al complejo MHC

Además, la capacidad de unirse al complejo MHC contribuye a la diferencia entre un antígeno y un hapteno. Es decir, los antígenos pueden unirse al complejo MHC mientras que los haptenos no pueden unirse al complejo MHC.

Unión a anticuerpos

Otra diferencia entre un antígeno y un hapteno es que los antígenos pueden unirse directamente a los anticuerpos, mientras que los haptenos no pueden unirse directamente a los anticuerpos.

Respuesta inmune

Además, una diferencia importante entre un antígeno y un hapteno es que los antígenos pueden desencadenar una respuesta inmune por sí mismos, mientras que los haptenos no pueden desencadenar una respuesta inmune por sí mismos.

Conclusión

En resumen, los antígenos son moléculas que pueden provocar una respuesta inmune por sí mismos, mientras que los haptenos necesitan unirse a una molécula portadora para convertirse en un antígeno completo, que desencadena la respuesta inmune. Tanto el antígeno como el aducto portador de hapteno sirven como inmunógenos. Por tanto, la principal diferencia entre un antígeno y un hapteno es la capacidad de provocar una respuesta inmunitaria de forma independiente.

Referencia:

1. "Antígenos". Lumen | Anatomía y fisiología ilimitadas, Disponible aquí

Imagen de cortesía:

1. & # 8220Antibody & # 8221 Por Fvasconcellos 19:03, 6 de mayo de 2007 (UTC) & # 8211 Versión en color de la imagen: Antibody.png, originalmente un trabajo del gobierno de los Estados Unidos (dominio público) a través de Commons Wikimedia
2. & # 8220Hapten & # 8221 Por MantOs & # 8211 Trabajo propio (CC BY-SA 3.0) vía Commons Wikimedia

Biografía del autor: Lakna

Lakna, licenciada en Biología Molecular y Bioquímica, es Bióloga Molecular y tiene un gran interés en el descubrimiento de cosas relacionadas con la naturaleza.